| 组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶重组大肠杆菌发酵条件研究 |
| 黄华[1] 苟斌全[1] 王永红[1] 储炬[1] 庄英萍[1] 张嗣良[1] 袁中一[2] |
| 关键词：青霉素G酰化酶 组成型表达系统 质粒稳定性 葡萄糖 |
| 主要内容：目的：对重组大肠杆菌组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶（AfPGA）进行了发酵条件研究。方法：在摇瓶和5L发酵罐中研究了（NH4）：SO4和葡萄糖浓度对质粒的分离稳定性及青霉素G酰化酶表达的影响。结果：该工程菌质粒具有分离不稳定性，培养基中无（NH4）2 SO4时发酵过程中pH和糊精水解生成葡萄糖的浓度变化较小，细胞前期（Oh-12h）的生长速率降低，质粒分离稳定性和青霉素G酰化酶的表达水平提高。发酵过程中维持低葡萄糖水平可以限制细胞的生长速率，提高质粒稳定性和促进青霉素G酰化酶的合成。采用混合碳源发酵，发酵培养基含糊精2g/L，12h后以1g/L·h恒速流加葡萄糖至35h，控制流加过程葡萄糖浓度0．1g／L左右，平均比生长速率为0．06h^-1，发酵结束时质粒稳定性为86％，青霉素G酰化酶的表达水平达23000U／L。结论：重组大肠杆菌组成型表达青霉素G酰化酶的研究对工业生产有一定指导意义。 |
| 《生物技术》 2006,16(4).-57-62 |
| 全文下载请进入http://hightech.stlib.cn/tpi_1/sysasp/include/index.asp |
微信公众号