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| 基因重组大肠杆菌表达截短型pZP3β的发酵条件优化 |
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| 谢秋玲[1] 陈小佳[2] 朱伟杰[3] 赵振云[4] 吴建虹[1] 徐万祥[5] 刘侃[1] 李菁[6] |
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| 关键词:截短型 猪卵透明带-3β 人肠杆菌 表达 发酵 |
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| 主要内容:目的:对已构建好的表达pZP3β蛋白(pZP130)工程菌的培养条件进行优化,通过在5L罐中发酵和Ni柱纯化,以期获取较大量目的产物。方法:在摇瓶中改变不同的培养及诱导条件,比较工程菌的生长和目的蛋白的表达,优化发酵条件;并在5L发酵罐中进行发酵,获得菌体,破碎后进行Ni柱纯化。结果:优化的发酵条件是:10%的接种量,加入2%甘油的培养基培养菌体3h后加入0.5mmol/L IPTG,诱导4h后收样。在5L发酵罐中发酵,获得菌体量36g/L,经Ni柱纯化,获得蛋白粗制品33mg/L发酵液。结论:截短型pZP3β蛋白可以在E.coli中获得较高表达,并且可以通过发酵和Ni柱纯化得到较大量的蛋白,这有助于pZP的深入研究和应用。 |
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| 《生殖与避孕》 2006,26(4).-195-199,213 |
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