高致病性禽流感病毒广谱嵌合抗体的构建表达及活性研究
 
夏琳[1,2] 罗文新[1] 吴君[1] 刘彦宁[1] 傅雅娟[1] 陈毅歆[1] 陈鸿霖[1] 金鑫[2] 夏宁邵[1]  厦门大学学报:自然科学版  2010,49(6).-845-849

H5N1 嵌合抗体 广谱活性
 
  高致病性禽流感病毒高度变异且缺乏有效的治疗药物.在前期研究工作中,本课题组发现一株鼠源广谱中和单抗13D4,在动物实验中显示出对H5N1禽流感病毒具有广谱治疗效果.在本研究中,从分泌13D4单克隆抗体的杂交瘤细胞株中抽提总RNA,经RT-PCR扩增出轻重链可变区DNA序列,并分别与人IgG1的轻重链恒定区基因序列拼接,构建人-鼠嵌合抗体.筛选出稳定表达嵌合抗体的CHO细胞株,从培养上清中纯化出嵌合抗体.竞争Elisa结果表明,嵌合抗体与鼠源单抗能够识别同一个抗原表位并具有相似的亲和力.血凝抑制反应和中和活性测定结果证明,13D4嵌合抗体保留了对不同亚型H5N1病毒的广谱反应性,并且对两株H5N1病毒具有中和活性.本研究获得的13D4嵌合抗体将具有潜在的治疗价值.
 
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