| 人Delta-like4^ext-26-217蛋白原核表达载体的构建及表达 |
| 黄斯勇[1] 伍艳兰[2] 刘利[1] 李国辉[1] 尹郸丹[1] 何飞[3] 张萍[3] 韩骅[3] 梁英民[1] 科学技术与工程 2011,11(22).-5254-5257 |
| Detla—like4 Notch信号途径 原核表达 血管发生 |
| 构建人Delta-like4^ext-26-21原核表达载体并表达。采用PCR方法扩增hDll4^ext-26—217多核苷酸序列，克隆入pMD18T载体。测序正确后，将其亚克隆入pET32a（＋）原核表达载体，获得pET32a（＋）-hDll4^ext-26-217载体。以该载体转化E．coli菌株BL21，IPTG诱导其表达。采用SDS-PAGE、WesternBlot方法鉴定目的蛋白的表达。结果表明，采用SDS—PAGE，Western Blot等方法均可检测到目的蛋白TRX／hDll4^ext-26-217，分子量约42．2KD。主要以包涵体形式大量存在。以上结果为Detla—like4功能的进一步研究奠定了基础。 |
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