| 三聚氰胺脱氨酶基因克隆表达及活性测定 |
| 涂追[1,2] 许杨[1,2] 季艳伟[1,2] 陶勇[2] 食品与生物技术学报 2011,30(2).-234-238 |
| 三聚氰胺 脱氨酶 大肠杆菌 重组蛋白 |
| 从载体pUC57-MDA中获得经过大肠杆菌密码子偏好性优化的三聚氰胺脱氨酶编码基因,将该基因连接至表达载体6HisT-pRSET中,构建了重组表达质粒6HisT-pRSET-MDA,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),得到重组工程菌BL-MDA并进行诱导表达,利用SDS-PAGE对表达产物进行分析并测定酶活性。SDS-PAGE电泳分析结果显示,表达上清液在53 000处有明显的蛋白质条带,与理论相对分子质量的吻合,其脱氨酶活性达5.61 U。 |