| E.coli酪氨酸转氨酶的纯化与非天然氨基酸的底物特异性检测 |
| 陈茹 王行国 何婷 张萍萍 湖北大学学报：自然科学版 2010,32(2).-210-213 |
| 酪氨酸转氨酶 纯化 非天然氨基酸 薄层层析 |
| 构建重组菌株E.coliBL21（DE3）转pET23a-tyrB,IPTG诱导其大量表达,然后依次通过盐析、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析获得纯酶,运用薄层层析技术（TLC）检测,结果表明纯化的TyrAT转氨酶对自身底物酪氨酸在37℃和50℃具有较高活性.分别加入非天然氨基酸L-正缬氨酸、L-新戊基甘氨酸、L-叔亮氨酸、D-正亮氨酸作为底物,检测到TyrAT转氨酶对L-叔亮氨酸在50℃下有活性,对D-正亮氨酸在37℃和50℃均有催化活性,且50℃下效果更好. |
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