| 利用油体蛋白体外重组技术实现牛肠激酶固定化应用 |
| 董立强[1,2] 李梅[2] 张燕燕[1,2] 孙文丽[2] 陈红漫[1] 刘昱辉[2] 湖北农业科学 2011,50(4).-849-853 |
| 油体蛋白 人工油体 肠激酶 固定化酶 |
| 为研究利用油体蛋白体外重组技术实现肠激酶固定化应用的可行性,利用油体蛋白Oleosin、自剪切蛋白Intein和人工合成的牛肠激酶轻链（Enterokinase,EK）cDNA,分别构建表达盒Intein-oleosin-EK和Intein-EK,插入毕赤酵母表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达后通过SDS-PAGE和Western-blot检测发现,带有Intein-肠激酶表达盒的阳性菌株中有目的蛋白的表达,而Oleosin-intein-肠激酶融合蛋白表达盒不能在酵母中表达。 |
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