通过基因工程构建谷氨酸生产菌B44的研究
 
周盛[1] 李家洲[1] 武波[2]  氨基酸和生物资源.2006,28(1).-33-36  

PCR克隆 表达载体 代谢途径
 
  从大肠杆菌E.coli k-12中通过PCR克隆出磷酸果糖激酶编码基因(pfkA),将其连到表达载体pCMVTNT^TMveclor。连接构建成重组质粒Ku-1,导入谷氨酸棒杆菌B4(已经诱变改造),并得到表达。酶活性测定表明Ku-1的pfkA基因在B44中得到表达(磷酸果糖激酶为128.6±0.86U/g蛋白)。解除磷酸果糖激酶对已经改造的谷氨酸的整个代谢途径的限制。同时,B44对糖转化率比B4(由出发菌株B1诱变而来)高10.64%,产酸率比B4高17.1%。
 
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