| 基因工程菌1020耐热木聚糖酶的纯化 |
| 孙雷 朱孝霖 李环 姚忠 韦萍 生物技术.2005,15(5).-51-53 |
| 耐热木聚糖酶 纯化 热变性 Ni—NTA亲和层析 |
| 目的：提纯基因工程菌1020耐热木聚糖酶。方法：超声破碎细胞，而后经过热变性处理和Ni—NTA亲和层析分离纯化。结果：根据pET System Manual的方法分析木聚糖酶主要分布在可溶性细胞质中；超声破壁功率400W，破碎15min时效果最佳；粗酶液经过70℃，热变性30min处理后，纯化倍数达到4．9；采用Ni—NTA Sephrose F．F一步层析可以得到电泳纯的木聚糖酶，纯化倍数13．4，得率29．4％。结论：热变性处理是一种有效的提纯手段，合理的条件可以使纯化倍数提高；Ni—NTA亲和层析是纯化含His标签的目的酶的特异高效纯化方法。 |
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