| 利用葡萄糖、木糖生产燃料酒精的基因工程菌构建 |
| 陆坚 韦宇拓 黄鲲 卢春花 黄目波 广西农业生物科学.2005,24(3).-187-190 |
| 运动发酵单胞菌 丙酮酸脱羧酶 乙醇脱氢酶 克隆 诱导表达 |
| 以运动发酵单胞菌的总DNA为模板,PCR扩增Zymomonas mobilis中的乙醇脱氢酶基因(adhB)和丙酮酸脱羧酶基因(pdc)。首先进行单个基因表达,基因表达产物经SDS—PAGE电泳分析和乙醛指示平板检测,确认有酶活性后,将这2个基因串联构建多顺反子表达质粒pSE—pdc—adhB,转入大肠杆菌DH5a内,得重组工程菌株。工程菌株经IPTG诱导,分别在含10%葡萄糖和10%木糖培养基中于37℃培养72h,有乙醇产生,酒精产率分别为对照菌株21倍和5倍。 |