| 分泌型重组铜绿假单胞菌外毒素A基因工程菌的发酵研究 |
| 胡晓梅 黄建军 饶贤才 胡金川 胡福泉 医学研究生学报.2004,17(5).-388-390 |
| 铜绿假单胞菌 外毒素A 发酵 |
| 目的:优化重组铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)基因工程菌的发酵条件,实现PEA的高效表达。方法:构建PEA的原核分泌型基因工程菌,利用摇瓶发酵研究PEA工程菌的最优表达条件,并放大至3.75L发酵罐水平。结果:摇瓶发酵的最优培养条件为温度30℃,摇床转速160r/min,在含2g/L葡萄糖的LB培养液中培养至A600≈2.5时,以终浓度为100μmol/L的异丙基硫基半乳糖(IPTG)诱导表达5h。3.75L发酵罐发酵与摇瓶发酵相比,发酵周期缩短了约三分之一,PEA表达水平接近摇瓶中发酵水平,目标蛋白表达率达到了26.6%。结论:利用摇瓶最优表达条件,较好地实现了重组PEA从摇瓶到发酵罐的放大。 |