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人胸腺素α1基因工程菌的构建与表达

林陈水黎小军王平梅建凤浙江工业大学学报.2005,33(3).-306-309

胸腺素α1（Tα1）基因克隆融合表达

胸腺素α1(Thymosin alpha 1，Tα1)是一种针对T淋巴细胞的免疫增强剂，临床用途广泛，为大量制备Tα1，按大肠杆菌惯用密码子合成编码Tα1的基因，克隆于pUCmT，转化E．coli JF1125，经测序证明序列正确后，克隆入pET39(b)的BspT1和BamH1位点，成功地构建出包含信号肽，DsbA，连接肽，6个His，EKsite(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)，胸腺素α1的表达载体，转化E．coli；BL21(DE3)，获得胸腺素α1基因工程菌。SDS-PAGE分析表明，经0．1mmol／L IPTG和30℃诱导8h，在大肠杆菌周质中大量表达表观分子量31kD左右的融合蛋白，为进一步获得大量可供实验研究和临床应用的重组胸腺素α1创造条件。