| 重组铜绿假单胞菌外毒素A工程菌发酵及表达产物的纯化 |
| 赵志强 杜琳 谭小梅 杜送田 王永谦 蒋奕 王燕 谢贵林 |
| 关键词：铜绿假单胞菌 外毒素A 工程菌 |
| 主要内容：目的 建立稳定、高效表达重组铜绿假单胞菌外毒素A（rEPA）的工程菌发酵及表达产物纯化工艺。方法 规模化发酵表达rEPA的重组大肠杆菌rPE553D，离心收集菌体，渗透压调解使菌体周质间隙蛋白释放后，高速离心收集蛋白溶液。经DEAE Sepharose FF、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析和SOURCE 30Q强离子交换层析，超滤浓缩纯化rEPA。用HPLC、SDS—PAGE和Western blot等方法检定生化和免疫学特性，并用小鼠和Vero细胞检定毒性。结果 每55L培养基中rEPA产量超过4g，纯度在95％以上，细胞毒性降低了至少32000倍。其余各项指标均符合《中国生物制品规程》要求。结论 已建立了收率高、纯度好、稳定、适合规模化生产rEPA的工艺。 |
| 《中国生物制品学杂志》 2006,19(4).-407-410 |
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