| 重组人VEGF165工程菌的发酵及表达产物的纯化与活性测定 |
| 刘煜[1] 吴国祥[2] 赵建阳[2] 颜天华[3] 奚涛[1] 沈子龙[1] 成国祥[2] |
| 关键词：rhVEGF165 血管内皮生长因子 巴氏毕赤酵母 纯化 生物活性 免疫原性 肝素亲和层析 |
| 主要内容：目的：优化重组人VEGF165(rhVEGF165)工程菌的发酵条件，分离纯化目的蛋白并检查活性。方法：考察了甲醇诱导浓度和诱导时间对目的蛋白表达量的影响；发酵液经离心、透析后，经肝素亲和柱层析、超滤制得纯品；采用CAM实验和血管内皮细胞MTT法测定生物活性，比较了与人VEGF165标准品的免疫原性。结果：最佳表达条件为：甲醇诱导浓度为1％，诱导时间为5～6d；采用Heparin-Sepharose CL6B亲和层析后，产物纯度可达90％以上；活性测定结果显示，目的蛋白具有促血管生成作用；与人VEGF165具有相似的免疫原性.结论：经发酵纯化后获得了有活性的重组人VEGF165纯品。 |
| 《中国药科大学学报》 2004,35(1).-82-85 |
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