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基因工程菌Pichia pastoris高密度培养条件的摇瓶研究

洒荣波[1] 石贵阳[1] 王正祥[2] 食品研究与开发.2005,26(2).-52-57

pastoris Pichia 培养条件基因工程菌摇瓶 KH2PO4 高密度培养培养基配方 MgSO4 FeSO4 MnSO4 250mL 发酵培养基优化试验发酵条件最佳配方培养时间发酵温度装液量葡萄糖种子液接种量三角瓶体密度组分氨水

对基因工程茵Pichia pastoris高密度培养的培养基进行了研究，选取了价廉易得的培养基，对此培养基各组分进行了优化，并对其它发酵条件进行了优化试验，得到了最优培养基配方及培养条件。结果表明，培养基最佳配方为：葡萄糖为5％，氨水单次补料量为20μL(250mL摇瓶装液量为20mL)，KH2PO4浓度为0．7％，培养基其它组分为：K2HPO40．1％、MgSO4．7H2O0．03％、FeSO4．7H2O0．05％、MnSO4．H2O0．05％。种子液最佳培养时间为40h，接种量为10％，250mL三角瓶装液量为20mL，摇床转速为220r／m，发酵培养基最佳初始pH5．5，发酵温度为30℃，发酵结束时间64h。在此优化的培养基及培养条件下，茵体密度达到最高，OD600达到64．3，细胞干重20．2g／L。