| 人B7．2（CD86）胞外区原核表达及其工程菌发酵培养的实验研究 |
| 闫晓彩 来宝长 等 |
| 关键词：B7.2（CD86） 共刺激 融合蛋白 GST 工程菌发酵培养 实验研究 抗原 原核表达 |
| 主要内容：目的 利用原核系统表达人B7．2（IgV+C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法 用聚合酶链反应（PCR）技术从B7．2cDNA全长中克隆B7．2（IgV+C)，将PCR产物克隆入表达载体pGEX-4T-3从而得到重组体pGEX-4T-3/h B7.2(IgV+C),SDS-PAGE及Western blot用于检测目的蛋白的表达，同时对目的蛋白诱导表达时间及诱导剂浓度进行优化，对重组质粒的遗传稳定性进行鉴定。结果 Westerm blot结果显示相应分子质量55kD处有hB7.2(IgV+C)与GST融合蛋白的高效表达，表达量占菌体总蛋白的30％左右。对工程菌进行发酵培养研究的结果表明，所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定，未见质粒丢失，目的蛋白的表达不受影响，且在37℃诱导5h、IPTG终浓度为4mmol·L^-1时其表达量最多。结论 证明了利用原核系统表达人B7.2(IgV+C)的可行性。 |
| 《西安医科大学学报》 2002,23(1).-4-7 |
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