| γ-谷氨酰基转肽酶（GGT）基因工程菌的构建及其发酵条件的初步研究 |
| 王娜 张洁 沈微 唐雪明 诸葛健 |
| 关键词：茶氨酸 γ-谷氨酰基转肽酶 生物转化 发酵条件 质粒稳定性 |
| 主要内容：利用PCR技术以Bacillus subtilis SYU 20016基因组DNA为模板，扩增出1．8kb编码γ-谷氨酰基转肽酶的基因ggt，将其连接到温控表达载体pBV220，得到重组载体pBV220-ggt，重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达。SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量大小为65kDa。同核酸序列测定的推导值相符。对含有ggt的基因工程菌进行表达研究表明：发酵培养温度为30℃，pH为7.2，装液量为20ml（250ml锥形瓶）的条件下42℃诱导4h后，重组菌的γ-谷氨酰基转肽酶酶活力达到6U／ml。目前报道的非基因工程菌（枯草芽孢杆菌NX-2）酶活最高仅为3．2U／ml。 |
| 《中国生物工程杂志》 2006,26(11).-48-53 |
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