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重组人胎盘抗凝蛋白变体基因工程表达菌的表达条件优化研究

袁辉华子春邓海兰东南大学学报：医学版.2004,23(4).-217-220

重组人胎盘抗凝蛋白变体基因工程表达条件优化大肠杆菌基因表达质粒稳定性

目的：探索重组人胎盘抗凝蛋白变体大肠杆菌表达菌株的最适表达条件。方法：详细研究重组人胎盘抗凝蛋白变体在大肠杆菌中表达时重组质粒稳定性、细菌培养、诱导物IPTG的用量和诱导时间与重组蛋白质表达水平之间的关系。结果：重组人胎盘抗凝蛋白变体大肠杆菌表达菌株具有非常好的质粒稳定性，不易发生质粒丢失现象。诱导剂IPTG量越多，最终OD600值越低；诱导时间长会导致较多的靶蛋白积累，OD600值与总蛋白成正相关关系。结论：获得了重组人胎盘抗凝蛋白变体的最适表达条件，经过纯化后，重组人胎盘抗凝蛋白变体的得率为40mg·L^-1。