| SARS冠状病毒核衣壳蛋白在酿酒酵母中的表达和纯化 |
| 杨雷 张洪勤 吴淑珍 |
| 关键词：严重急性呼吸综合征 SARS病毒 核衣壳蛋白 RT—PCR 克隆 基因表达 |
| 主要内容：目的：构建重组表达质粒pYES6-N，诱导SARS冠状病毒核衣壳蛋白（nucleocapsid protein）在酿酒酵母中的表达和纯化。方法：逆转录获得SARS冠状病毒DNA片段，PCR获得核衣壳蛋白基因互相重叠的两部分片段，酶切连接成全长，在E.coli JM109中构建重组表达克隆pYES6-N，在酿酒酵母中诱导表达并纯化。结果：重组克隆pyes6-N经酶切、测序鉴定确定，插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致，获得一个完整的核衣壳蛋白基因，表达产物纯化后，电泳鉴定，相对分子质量近45000。结论：成功克隆SARS冠状病毒核衣壳蛋白基因全长，并在酿酒酵母中诱导表达成功，有助于抗SARS分子疫苗的研究。 |
| 《实用医学杂志》 2006,22(23).-2708-2710 |
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