| 产甘油假丝酵母产甘油关键酶基因在酿酒酵母中的表达 |
| 赵有玺[1,2] 饶志明[1] 沈微[1] 方慧英[1] 诸葛健[1] |
| 关键词：甘油 3-磷酸甘油脱氢酶 3-磷酸甘油磷酸酶 酵母工程菌 |
| 主要内容：甘油是一种极其理想的耐高渗透压介质。利用PCR方法，从产甘油假丝酵母W12002-5中扩增出了2个产甘油的关键酶基因GPD和GPP，分别编码3-磷酸甘油脱氢酶（glycerol 3-phosphate dehydrogenase，GPD）和3-磷酸甘油磷酸酶（glycerol 3-phosphate phosphatase，GPP）。利用T-Vector在Escherichia coli JM109中克隆得到大量的GPD和GPP基因，并成功构建了重组质粒pYX212-GPD和pYX212．GPP；通过LiAc转化法将重组质粒导入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W303-1A。初步实验结果表明：发酵过程中pYX212-GPD／S．cerevisiae W303-1A的生物量高于pYX212-GPP／S．cerevisiae W303-1A和野生型S．cerevisiae W303-1A；发酵72h后，pYX212-GPD／S．cerevisiae W303-1A发酵液中甘油含量大约为12mmol／L，明显高于野生型S．cerevisiaeW303-1A的甘油含量，而pYX212-GPP／S．cerevisiae W303-1A与野生型S．cerevisiae W303-1A在甘油含量上相差不大，均只有4mmol／L左右。 |
| 《中国生物工程杂志》 2006,26(1).-38-41 |
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