| 瑞氏木霉内切葡聚糖酶基因在酿酒酵母中的表达研究 |
| 丁新丽 黄晶 汪天虹 |
| 关键词:分泌型表达 酶基因 葡聚糖 启动子 拷贝数 重组质粒 酿酒酵母 转化子 电转化 信号肽序列 |
| 主要内容:将PCR合成的瑞氏木霉(Trichoderma reesei)β-内切葡聚糖酶Ⅰ(EGⅠ)cDNA基因片断分别插入酵母met10和pgk1启动子和终止子序列之间,构建了在不同启动子控制下,具有不同拷贝数的eg1表达分泌质粒pRS415ME、pRS415PE和pRS425PE。通过电转化使重组质粒转移至实验室酿酒酵母H158菌株中,分别得到了3株酵母转化子H1p、H2p和H1m。在3株酵母转化子中,重组β-内切葡聚糖酶Ⅰ都能在酶自身信号肽序列引导下进行分泌型表达。在YPD培养基中3株重组酵母生长速率大致相同,H1m,H1p与H2p的内切葡聚糖酶活力分别为70.4,126.7和125.0U/mL。 |
| 《食品与发酵工业》 2004,30(11).-18-22 |
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