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| 酿酒酵母表达的rHBcAg颗粒的纯化和鉴定及其透射电镜观察 |
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| 陈恒[1] 梁婉琪[2] 张大兵[2] |
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| 关键词:酿酒酵母 表达 rHBcAg颗粒 纯化 鉴定 乙肝核心抗原 超离心 透射电子显微镜 |
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| 主要内容:乙肝核心抗原(HBcAg)蛋白基冈(C基因)在酿酒酵母中表达,表达产物经过分离和Sepharose CL-4B柱子的初步纯化。产物经SDS—PAGE和Western blotting鉴定为一分子量约21.5kDa的多肽。再经蔗糖密度梯度超离心和CsCl等密度梯度超离心等过程而被纯化。分管收集的超离心纯化产物经ELISA抗原活性检测和密度分析,可知ELISA反应强度较高的收集管中的颗粒密度主要分布在1.27g/mL和1.40g/mL两个峰值处。将rHBcAg抗原活性最高的收集管合并,再经TEM观察,发现酵母表达的rHBcAg蛋白(核心蛋白)能自主装配成大小不同的两种核心颗粒,大颗粒直径约为30.1±2.4nm,小颗粒直径约为21.5±3.3nm。这表明,酿酒酵母表达的rHBcAg颗粒具有大小不同的二态性,其生物学意义还未明了,需进一步研究和探讨。 |
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| 《中国病毒学》 2004,19(2).-101-104 |
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