| 人血管抑制素在酿酒酵母中的分泌表达和活性鉴定 |
| 卢文菊[1] 罗进贤[2] 等 |
| 关键词：人血管抑制素 酿酒酵母 分泌表达 活性鉴定 |
| 主要内容：将酵母交配因子（MF）α1信号肽编码序列和人血管抑制素（hAGN)cDNA融合序列插入穿梭载体pYADE4，构建得到分泌型重组表达质粒pYADEMA18.转化酿酒酵母JG1107后，用2％乙醇和2％甘油联合诱导表达。ELISA分析表明，在诱导14h-30h期间，hAGN获得了表达并分泌至细胞外。发酵上清液经75％饱和度硫酸铵沉淀、CM－52纤维素离子交换层析和Superdex-75凝胶过滤层析纯化。SDS－PAGE分析显示，表达产物重组人血管抑制素（rhAGN)相对分子质量约50kD，电泳纯度达到94％。生物活性分析证明，rhAGN在0.01mg/L-3.0mg/L浓度范围内能够抑制人真皮内皮细胞株HDMEC增殖，抑制作用随剂量的增加而增强。 |
| 《中国生物化学与分子生物学报》 2002,18(2).-156-160 |
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