| 瑞氏木霉内切葡聚糖酶Ⅲ基因的克隆及在酿酒酵母中的表达 |
| 肖志壮 王婷 等 |
| 关键词：内切葡聚糖酶Ⅲ 瑞氏木霉 酿酒酵母 基因表达 蛋白质分泌 |
| 主要内容：采用刚果红染色法从瑞氏木霉cDNA文库分离到一株具有CMCase活性的阳性克隆，测序结果显示该基因所编码的蛋白质为瑞氏木霉内切葡聚糖酶III（EGIII），对重组酿酒酵母所产生的ECIII进行了酶学性质分析，其最适pH为5．0，最适温度为60℃，检测了酿酒酵毒蛋白质分泌系统组分SS02和SEB1对ECIII分泌的影响，结果表明，在可过量表达蛋白质分泌系统组分SSO2的酿酒酵母H837中，EGIII的分泌最高，由此分析，酿酒酵母SSO2蛋白可能在EGIII的分泌中，是一个限速步骤，通过PCR方法删除EGIII基因5'端非翻译区的98bp核苷酸序列使EGIII表达量提高了5．3倍，这提示我们，瑞氏木霉的EGIII基因在酿酒酵母细胞中表达时，其mRNA5'端先导序列中可能存在影响该基因表达水平的调控序列。 |
| 《微生物学报》 2001,41(4).-391-396 |
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