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基因工程人丁酰胆碱酯酶的纯化及其在体外对琥珀酰胆碱的解毒作用

魏婉丽[1] 秦浚川[2] 等中国药理学与毒理学杂志.2002,16(6).-454-458

丁酰胆碱酯酶纯化琥珀酰胆碱解毒

目的：开发丰富又安全的人丁酰胆碱酯酶来源，并检测其解毒效率。方法：家蚕血淋巴液中重组人丁酰胆碱酯酶（rhBChE)的纯化采用批量硫酸铵分段分离和普鲁卡因酰胺－脂糖凝胶4B亲和层析技术。结果：聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的rhBChE从血淋巴液中的总收率为66％，酶比活性达715mmol·min^-1·g^-1蛋白。rhBChE在－20℃含20％甘油及0．02％ NaN3的10mmol·L^-1磷酸盐缓冲液（pH7.4)中存放1年，酶活性无明显变化。18只小鼠ip事先与rhBChE孵温的1．5LD的琥珀酰胆碱，不出现任何中毒症状和体征，全部存活；而琥珀酰胆碱对照组，18只小鼠均剧烈抽搐并在2－5min内窒息死亡。结果：实验结果说明，从感染家蚕幼虫血淋巴液中纯化rhBChE的方法可靠，基因工程rhBChE在琥珀酰胆碱中毒危象的治疗中有潜在应用前景。