以冻融法快速纯化高活力基因工程Taq DNA聚合酶
 
孙亮先 骆红梅 等  江西农业大学学报.2001,23(4).-495-497  

Taq DNA聚合酶 纯化 聚合酶链式反应 PCR技术 冻融法 基因工程
 
  用含有TaqDNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli DH5α菌株,IPTG诱导表达Taq DNA聚合酶,利用该酶的热稳定性,反复2次-70℃,75℃交替冻融以裂解细胞释放胞浆;以高速离心除去冻融变性的细胞碎片及核酸蛋白的复合物以达到快速纯化Taq DNA聚合酶的目的。PCR扩增反应和SDS-PAGE分析表明所制备的Tap DNA聚合酶的纯度,活力,敏感性,特异性均达到试验要求。该方法具有快速简便的优点。
 
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