| 单甲氧基聚乙二醇修饰蚓激酶的制备及性质研究 |
| 应国清[1] 易喻[1] 石陆娥[1] 王普[1] 胡妙申[2] |
| 关键词：蚓激酶 化学修饰 单甲氧基聚乙二醇 抗原性 |
| 主要内容：采用以三聚氯氰活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG-5000)，对从赤子爱胜蚓体内提取的抗血栓酶——蚓激酶进行了化学修饰，以期降低其抗原性及增加它的稳定性。实验表明，在37℃下，15．0mL，pH9.2，0.1mol·L^-1的硼酸缓冲液中，按每10mg的蚓激酶加入255mg活化的mPEG，水浴保温1h，经透析、超滤浓缩、冻干得mPEG修饰酶，测得蚓激酶的修饰率为63.2％，酶活回收率为56.6％。在此基础上，对修饰蚓激酶的性质进行了研究。结果显示，修饰后的蚓激酶对底物的亲和力有所增加(天然酶表观米氏常数Km值为0．267mg·mL^-1，修饰酶Km’值为0.115mg·mL^-1)；修饰蚓激酶的抗胰蛋白酶水解能力、热稳定性均优于天然酶；同时修饰酶的抗原性有了较大程度的降低，与抗血清的结合能力大约是天然酶的25.0％左右。 |
| 《高校化学工程学报.2005,19(4).-527-531》 |
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