| Bacillus pumilus WL-11木聚糖酶A的纯化、鉴定及其底物降解方式 |
| 许正宏[1] 陶文沂[2] |
| 关键词：短小芽孢杆菌，木聚糖酶，纯化，底物降解 |
| 主要内容：对一株Bacillus pumilus WL-11木聚糖酶的纯化、酶学性质及其底物降解模式进行了研究。经过硫酸铵盐析、CM-Sephadex及Sephadex G-75层析分离纯化，获得一种纯化的WL-11木聚糖酶A，其分子量为26．0kD，pI值9．5，以燕麦木聚糖为底物时的表观Km值为16．6mg／mL，Vmax值为1263μmol／(min·mg)。木聚糖酶A的pH稳定范围为6．0至10．4，最适作用pH范围则在7．2至8．0之间，是耐碱性木聚糖酶；最适作用温度为45℃～55℃，在37℃、45℃以下时该酶热稳定性均较好；50℃保温时，该酶活力的半衰期大约为2h，在超过50℃的环境下，该酶的热稳定较差，55℃和60℃时的酶活半衰期分别为35min和15min。WL-11木聚糖酶A对来源于燕麦、桦木和榉木的可溶性木聚糖的酶解结果发现，木聚糖酶A对几种不同来源的木聚糖的降解过程并不一致。采用HPLC法分析上述底物的降解产物生成过程发现木聚糖酶A为内切型木聚糖酶，不同底物的降解产物中都无单糖的积累，且三糖的积累量都较高；与禾本科的燕麦木聚糖底物降解不同的是，木聚糖酶A对硬木木聚糖降解形成的五糖的继续降解能力较强。采用TLC法分析了WL-11粗木聚糖酶降解燕麦木聚糖的过程，结果表明燕麦木聚糖能够被WL-11粗木聚糖酶降解生成系列木寡糖，未检出木糖，这说明WL-11主要合成内切型木聚糖酶A，同时发酵液中不舍木糖苷酶，适合用来酶法制备低聚木糖。 |
| 《生物工程学报.2005,21(3).-407-413》 |
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