| 重组大肠杆菌催化合成谷胱甘肽的研究 |
| 沈立新[1] 魏东芝[2] 尧辉[2] |
| 关键词：γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 谷胱甘肽合成酶 克隆 谷胱甘肽合成 |
| 主要内容：利用PCR技术扩增编码γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHⅠ)及谷胱甘肽合成酶(GSHⅡ)的基因，并进行了部分序列分析，分别构建了表达质粒pTrc—gshI和pTrc—gshⅡ，它们在E．coliBL21中的稳定性很好。在E．coliBL21(pTrc—gshI)：E．coliBL21(pTrc—gshⅡ)-3：1的情况下，谷胱甘肽的合成达3．31g／L，高于工程菌E．coliBL21(pTrc—gsh)催化合成的谷胱甘肽的量(2．51g／L)。利用E．coliBL21(pTrc—gshI)与E．coliBL21(pTrc—gshⅡ)将γ-谷氨酰半胱氨酸的合成与谷胱甘肽的合成分步进行，谷胱甘肽的合成达3．78g／L，比利用E．coliBL21(pTrc—gsh)采用两步法合成的谷胱甘肽高42．1％，解决了GSH对GHI的反馈抑制，并降低了ADP对第二步反应的抑制程度。 |
| 《西北大学学报：自然科学版》 2003,33(5).-554-557 |
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