| 汉逊酵母高密度发酵表达乙型肝炎表面抗原的甲醇流加控制策略 |
| 杨喆[1] 刘红岩[1] 马波[1] 郭仁[1] 代云波[1] 李昌军[2] 侯峰[1] 谢飞[1] |
| 关键词：汉逊酵母 高密度发酵 表达 乙肝表面抗原 甲醇 流加 |
| 主要内容：目的考察不同甲醇流加策略对汉逊酵母（Hansenula polymorpha）高密度发酵表达重组乙型肝炎表面抗原的影响。方法在细胞生长阶段采用DO/pH在线测量的控制方法,使酵母细胞密度达到一个较高水平,诱导期比较DO-Stat/pH-Stat法和离线检测甲醇两种控制流加甲醇的方法,同时也比较用甘油和甲醇双碳源间断流加法与单纯流加甲醇法对目的蛋白表达的影响。结果诱导期用DO-Stat和pH-Stat法不能有效地提高乙肝表面抗原表达量,而离线检测甲醇的控制方法,在诱导阶段可将甲醇浓度控制在0~5g/L的范围,乙肝表面抗原表达量比DO-Stat/pH-Stat法提高了20%。甲醇氧化酶（MOX）酶活性的变化与乙肝表面抗原表达量变化存在对应关系,交替加入甘油和甲醇双碳源刺激,可以使乙肝表面抗原表达量达到395mg/L。结论已筛选出优化工艺配置,并建立了切实可行的规模化生产工艺。 |
| 《中国生物制品学杂志》 2007,20(11).-851-854 |
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