反相高效液相谱型分析检测吸水链霉菌17997变株发酵新产物
 
赫卫清 李京艳 孙桂芝 刘玉瑛 王以光

关键词:反相高效液相色谱 吸水链霉菌17997 基因阻断 化学早期鉴别
 
主要内容:以吸水链霉菌17997为出发菌株。分别阻断格尔德霉索(geldanamycin,GA)生物合成酶基因簇中的Ⅰ型聚酮合酶(type Ⅰ polyketide synthase,pks)基因的第6模块,单加氧酶(monooxygenase,gdmM)基因和氨甲酰基转移酶(carbamoyltransferase,et)基因得到3种变株(pks^-)、(gdmM^-)和(ct^-)。比较变株与原株发酵产物的HPLC谱型,结合紫外吸收图谱分析。检测结果表明各变株的GA生物合成均被阻断。并产生3个不同于原始菌株的新物质。这证明基因操作所涉及的pks,gdmM和ct基因是GA生物合成的必需基因;这些基因的阻断可产生不同于原株的新物质。HPLC谱型比较可以在多样化代谢产物的产生菌中快速、准确地发现基因工程变株发酵产物的变化。指导新化合物的分离鉴定,样品用量甚微。是化学早期鉴别的有力工具。
 
《中国抗生素杂志》  2006,31(3).-168-171
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