| 蛇毒锯鳞蝰素融合蛋白的发酵与纯化 |
| 杨利军[1] 杨涛[1] 程牛亮[1] 解军[1] 牛勃[1] 王国亮[2] 杨琦[3] |
| 关键词：蛇毒锯鳞蝰素 大肠杆菌 发酵 纯化 |
| 主要内容：研究大肠杆菌表达重组蛇毒锯鳞蝰素（Echistatin，Ecs）融合蛋白的发酵和纯化工艺。将Ecs基因插入表达载体pTXB1，转化E．coli BL21（DE3）构建工程菌。对工程菌进行补料分批培养并诱导表达，研究培养基、培养和诱导时间对工程菌生长和目的蛋白表达的影响，几丁质亲和层析纯化Ecs融合蛋白，经DTT裂解后，检测Ecs活性。发酵后菌体湿重可达75g／L，融合蛋白表达量约占总蛋白的35％，重组质粒在BL21宿主菌中传代稳定。亲和层析纯化后，得到Ecs单体，得率为28mg／L发酵液。生物学活性分析显示，重组Ecs能有效抑制血小板的聚集，其活性与天然Ecs相似。优化了Ecs融合基因工程菌的发酵和纯化条件，为规模化生产奠定基础。 |
| 《微生物学报》 2006,46(1).-95-98 |
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