| 用重组大肠杆菌生产rhG-CSF高密度发酵的方法 |
| 王海波[1] 王骊丽[2] 欧俊杰[2] 耿信笃[2] |
| 关键词：粒细胞集落刺激因子 重组 发酵 流加培养 |
| 主要内容：目的：优化重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony-stimulating factor，rhG-CSF)的生产工艺，了解菌体生长和产物合成规律，为rhG-CSF的工业化生产提供依据．方法：以摇瓶发酵的研究结果为基础，在5L发酵罐中，测定工程菌rhG-CSF的生长曲线，根据在不同pH值、溶氧和诱导时机时工程菌生长的情况，研究重组大肠杆菌DH5(／pBV220生产rhG-CSF分批补料培养的工艺条件，确定5L发酵罐稳定的发酵工艺参数．结果：培养工程菌的优化条件为：发酵前期流加2mol／L的氢氧化钠控制pH值为7．2，当开始诱导表达时，控制pH为6．8；溶氧水平控制在50％以上；选择菌体在对数生长中期A600nm值为12．0进行诱导表达．在此优化的培养条件下，菌体A600nm值达到(21．3±0．9)，细胞干质量可达(12．3±0．7)g／L，细胞湿体积质量为(43．8±0．9)∥L，rhG-CSF的表达量为(41．9±1．6)％．结论：pH值、溶氧和诱导时机等培养条件对工程菌生长和表达有显著影响． |
| 《第四军医大学学报》 2004,25(12).-1085-1088 |
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