| 大肠杆菌发酵生产重组人源抗—HBs Fab |
| 安峰[1] 范列英[2] 等 |
| 关键词：大肠杆菌 发酵生产 重组人源抗－HBs Fab 分批补料发酵培养 人源化抗体 |
| 主要内容：在KLF2000发酵罐中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pBAD/HBs Fab的TOP10大肠杆菌，生产人源抗-HBs Fab，为批量生产作准备，在发酵过程中，控制溶氧30%以上，温度37℃，在基础培养基内生长4h后，补加以甘油为碳源的补料，继续生长到9h，加入阿拉伯糖，至终浓度为0.02%，30℃诱导表达5h，收集菌体，纯化制备目的蛋白。利用Western blot方法检测Fab抗原性，Dot blot方法检测生物学活性。14h发酵结束后，菌体密度最终达96g/L，纯化所得蛋白大约占菌体总蛋白的6%，含量为80mg/L，以重组质粒pBAD/HBs Fab，大肠杆菌TOP10表达表达比率与摇瓶相比没有降低，表达量达80mg/L左右，为大批量生产作了准备。 |
| 《生物工程学报》 2003,19(1).-87-91 |
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