| 高密度发酵制备重组人可溶性TRAIL |
| 王梁华[1] 周劲松[2] 等 |
| 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 重组蛋白质 发酵 分批补料 重组人可溶性TRAIL |
| 主要内容：目的：利用原核重组表达技术，完成人可溶性肿瘤坏死因子凋亡诱导配体（TRAIL，又称凋亡素2配体，Apo-2L)的中试。方法：可溶性TRAIL编码基因插入改建的pBV220载体；在发酵过程中，控制溶解氧在30％－50％，30℃生长6h,42℃诱导培养4h；菌体上清行金属亲和层析。结果：发酵液中最终菌体密度D（600）达8．0（相当于每升发酵液含15g湿菌体），TRAIL占菌体总蛋白的40％左右，含量超过0．6g/L。其中，所表达的TRAIL20％－30％在上清而直接有活性，70％－80％呈包涵体。上清用亲和层析一步使其纯度达70％以上；包涵体超声破菌后经两次洗涤，纯度达到80％以上。结论：TRAIL在大肠杆菌中达到了高表达。 |
| 《第二军医大学学报》 2002,23(2).-132-135 |
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