激光扫描共聚焦显微镜检测核因子kB
 
王开颜[1] 阮旭中[2] 等

关键词:显微镜检查 核因子kB 激光扫描 共聚焦 显微镜
 
主要内容:目的:探讨激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)检测核因子kB(NF-kB)的方法,方法,用肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激PC12细胞NF-kB活化,间接免疫荧光(FITC)标记代表NF-kB的P^65亚基,碘化丙啶(PI)标记细胞DNA指示核区,用CLSM对NF-kB进行定位显示和定量分析,以WesternBlot检测结果作为对照标准。结果:TNF-α刺激后PC12细胞以XLSM显示:核区内出现代表NF-kB的绿荧光,其核区与胞浆区比值(FN/FC)明显大于未经TNF-α刺激的PC12细胞;而 TNF-α刺激的PC12细胞红色的核区内未出现绿色荧光。WesternBlot显示TNF-α刺激后PC12细胞核提取物呈阳性反应,即出现代表NF-kB/P^65蛋白的条带, TNF-α刺激的PC12细胞核提取物呈阴性反应,即核提取物中未出现代表NF-kB/p^65蛋白的条带,CLSM检测NF-kB与Western Blot检测结果一致。结果论:CLSM检测NF-kB即可定位显示,又定定量分析,能显示单个细胞的NF-kB状态,且具有同时显示细胞形态等优点,是研究细胞核因子的有效方法。
 
《中华物理医学与康复杂志》  2001,23(3).-141-143
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