| GDNF缺失突变体的设计及其结构与功能关系 |
| 王金惠 冯健男 等 |
| 关键词：GDNF 缺失突变体 结构 功能 设计 |
| 主要内容：研究了GDNF结构与功能的关系，基于鼠源GDNF的晶体结构，利用计算机SGI Indigo(R4400)工作站和Insight Ⅱ（95．5）蛋白质分析软件模拟了人GDNF三维结构，设计了GDNF分子的两个缺失突变体ΔN1－28和ΔN78－90，以野生型GDNF cDNA作为模板，用PCR法得到编码缺失突变体的DNA片段，将大肠杆菌作为表达系统，使缺失突变体GDNF在大肠杆菌中表达，对表达产物纯化和复性后进行生物活性测定，两株突变体在大肠杆菌中获得了高效表达，纯化后的GDNF突变体ΔN1－28可以与存在于KG－1a细胞表面的受体结构，但不能促进8日龄鸡胚背根节突起的生长，突变体ΔN78－90既不能与受体结合，同时也失去了促背根节突起生长的功能，说明GDNF分子的N端氨基酸对分子的生活学活性很重要，但对分子与受体GDNFR－α的结合并不是必需的，而分子中的螺旋区对分子与受体的结合以及生物学活性都必不可少。 |
| 《中国生物化学与分子生物学报》 2001,17(5).-557-562 |
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