| 电喷雾质谱法研究细胞色素Tb5及其F35Y突变体蛋白肽链和脯基的相互作用 |
| 余忡天[1] 王韵华[2] 等 |
| 关键词：细胞色素Tb5 突变体蛋白 血红素b 电喷雾质谱法 非共价结合 肽链 辅基 相互作用 |
| 主要内容：本文通过牛肝线粒体细胞色素Tb5和它的F35Y突变体蛋白相对分子质量的外标法测定，得到细胞色素Tb5全蛋白的相对分子质量为10077．5；脱辅基蛋白的相对分子质量为9 461．4．F35Y突变体全蛋白的相对分子质量为10093．6，它的脱辅基蛋白相对分子质量为9477．5。不同nozzle电压下的电喷雾质谱结果表明，该电压的大小明显影响蛋白肽链与血红素辅基之间的非共价结合。随着电压的降低，全蛋白质谱峰的强度逐渐增大。然而，过低的电压导致了Na^+，K^+离子加合峰相对强度的增加，而不利于谱图分析。同时，考虑到细胞色素Tb5在甲醇溶液和酸性溶液中的变性行为，因此选择nozzle电压为70V，10％的甲醇水溶液和pH＝7为得到全蛋白质谱峰的最佳条件。相同实验条件不得到的野生型Cyt和F35Y突变体全蛋白的质谱峰相比较，其相对丰度有悬殊的差异，表明F35Y突变体蛋白的血红素结合能力明显低于野生型蛋白。通过对解离出来的Heme b的分子离子峰进行解析，证明铁仍以三价离子存在于血红素辅基中。 |
| 《化学学报》 2001,59(6).-956-960 |
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