| F—Box蛋白家族新成员FBX030基因的融合表达 |
| 李忠花 张小慧 等 |
| 关键词：融合表达 F－box蛋白 亲和层析 基因 |
| 主要内容：采用非定向克隆技术将FBOX30（F－box only protein 30)基因编码区cDNA序列克隆到哺乳类融合表达载体pEGFP-C2中，通过脂质体转染，将pEGFP-C2/FBX030导入NIH 3T3细胞株，并在荧光显微镜下观察融合蛋白的表达。采用定向克隆技术将FBXO30基因编码区cDNA序列克隆到表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠杆菌，结果显示FBXO30蛋白主要存在于胞浆中，十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹均检测到一条约65．5kD左右的新增蛋白泳带，此外，还用谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析柱获得了纯化的该融合表达产物，FBXO30蛋白为胞浆蛋白，以可溶性的形式存在，它能在原核表达体系中稳定表达，这对制备其特异性抗体和从蛋白水平研究其功能均具有十分重要的意义。 |
| 《湖南医科大学学报》 2001,26(6).-495-498 |
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