用定点诱变技术鉴定蛇毒解联蛋白RGD侧翼氨基酸残基的结构和功能
 
徐存拴[1] RAHMANSalman[2]

关键词:定点诱变 整联蛋白 解联蛋白 RGD模体 蛇毒蛋白
 
主要内容:为了证实蛇毒蛋白RGD侧翼氨基酸残基对ADP诱导的血小板凝聚抑制作用的重要性,分析了RGD环上游氨基酸残基对解联蛋白活性的影响。将位于两种角联蛋白蝮蛇毒素(kistrin)和华丽蛇毒素(elegantin)之间的氨基酸残基和RGD环内的氨基酸残基进行杂交。用定点诱变技术奖elegantin一级结构骨的KKKR^44T^45I^46/A^50RGDN^54P^55分别突变为SKAG^44T^45I^46/P^50RGDM^54P^55和 SKAG^44I^46/P^50RGDM^54P^55,这些序列和kistrin中相应的序列S^39RAGT^43/A^50RGDN^54P^55有相似之处,序列由KKKR^44T^45I^46/A^50RGDN^54P^55突变为SKAG^44T^45I^46/P^50RGDM^54P^55,显著地降低了elegantin对血小 板凝聚的抑制因子的活性,而T^45的缺人(KKKR^44T^45I^46/A^50RGDN^54P^55突变为SKAG^44T^45I^46/P^50RGDM^54P^55)支增强了elegantin对血小板凝聚的抑制作用,进一步研究证明它们的电泳特性是不同的。表明降RGD模体上游39-45倍的氨基酸与RGD侧翼氨基酸残基序列对解联蛋白的结构和功能具有重要作用。
 
《生物化学与生物物理学报:英文版》  2001,33(2).-153-157
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