| 人67KDa层连蛋白受体前体蛋白的基因克隆、表达及其免疫原性 |
| 时永全 翟惠虹 等 |
| 关键词：人67KDa层连蛋白受体前体蛋白 基因克隆 表达 免疫原性 |
| 主要内容：目的 克隆、表达人67KDa层连蛋白受体前体蛋白（67KDa laminin erceptor precursor，LRP）并检测其免疫原性。方法 应用RT-PCR从胃癌细胞SGC7901中扩增编码LRP的cDNA，将其按照T-A克隆法重组人pUCm-T载体并进行DNA序列测定。采用DNA重组技术构建原核表达载体pQE30-LRP；用M15/pQE系统表达6x组氨酸与LRP的融合蛋白，并以SDS-PAGE和Western blot进行所获融合蛋白，用含融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶颗粒免疫小鼠，以Westerm blot检测小鼠血清的抗体活性。结果 DNA测序结果证实所扩增的cDNA片段与LRP的基因序列完全相符。SDS-PAGE检测显示，经IPTG诱导2h后，M15/pQE30-LRP总蛋白中出现一条34KDa的新生蛋白带，Westerm blot进一步证实该新生蛋白为融合蛋白，其免疫小鼠血清经Westerm blot检测仅识别SGC7901细胞中一条大小约为42KDa的蛋白带；其血清即使被稀释2000倍，仍然显示与靶蛋白有较强的结合活性。结论 成功地克隆、表达了人LRP，并具有良好的免疫原性。 |
| 《中国生物制品学杂志》 2002,15(3).-129-133 |
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