二磷酸腺苷琼脂糖亲和层析法纯化HSP70多肽复合物
 
杨杪[1] 黄畦[2] 等

关键词:二磷酸腺苷琼脂糖 亲和层析法 纯化 HSP70多肽复合物
 
主要内容:采用二磷酸腺苷(ADP)琼脂糖亲和层析的方法,从小鼠肝脏或肿瘤组织中纯化热休克蛋白(HSP)70多肽复合物。用Western blot和硝酸银染色对所纯化的蛋白质进行鉴定,表明纯化的蛋白质为均一的HSP70。为了证实纯化的HSP70是否为HSP70多肽复合物,将此纯化物与10mmol/L ATP,3mmol/L MgCl2,0.5mmol/L CaCl2孵育后,用centricon 10滤过并收集小分子片段,经反向高压液相色谱分析,发现在215nm和220nm有很多吸收峰,证明此HSP70为HSP70多肽复合物。一般情况下,采用ADP琼脂糖亲和层析方法1g组织可以获得120μg HSP70多肽复合物。
 
《华中科技大学学报:医学版》  2002,31(3).-245-247
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