| 视黄醇结合蛋白L35和Q98位点突变及其对与视黄醇结合的影响 |
| 王世春 刘云 等 |
| 关键词：视黄醇结合蛋白 L35 Q98位点 突变 功能 |
| 主要内容：根据视黄醇结合蛋白（RBP）晶体结构和计算机模拟对拟突变位点所作出的结构预测，筛选出2个可能对RBP结合能力有影响的氨基酸位点。利用定点突变技术分别将35位亮氨酸突变为能引入较大构象变化的甘氨酸，将98位谷氨酰胺突变为亲水、带正电的精氨酸。将突变后的RBP基因转入表达宿主菌获得表达后，对突变体蛋白实现了变性条件下的分离纯化。复性后与视黄醇的荧光增强饱和滴定试验表明，35位突变为甘氨酸后对RBP结合能力没有产生明显的影响，但98位突变为精氨酸后，则显著的提高了与视黄醇的结合能力，说明98位是影响RBP与视黄醇结合和解离的重要位点。 |
| 《中国生物化学与分子生物学报》 2002,18(2).-213-216 |
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