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| BCG HSP65—GP2融合蛋白的原核表达及其鉴定 |
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| 王丽娟[1] 吴士彬[2] 等 |
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| 关键词:热休克蛋白质类 原核表达 Western-blot |
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| 主要内容:目的:表达可能对多种表皮来源的肿瘤具有预防及治疗作用的卡介苗热休克蛋白65(BCG HSP65)与人Her-2/neuCTL表位(GP2)构成的融合蛋白(BCG HSP65-GP2)。方法:将已构建的经筛选确定为正向重组的原核表达质粒PET15b-BCGHSP65-GP2转化感受态宿主菌BL21(DE3)PlysS,加IPTG诱导后,提取全菌总蛋白进行SDS-PAGE分析,并用Western-blot验证有无特异性目的蛋白表达。结果:SDS-PAGE分析显示,带正向重组质粒的菌株经IPTG诱导后,表达了一相对分子量约为62.3kD的新蛋白,Western-bolt结果显示诱导组具有特异性阳性条带。结论:BCGHSP65-GP2融合蛋白得到正确表达,使简便获得大量BCGHSP65-GP2融合蛋白成为可能,为肿瘤疫苗的研究奠定了基础。 |
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| 《蚌埠医学院学报》 2002,27(6).-476-478 |
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