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| DnaJ类分子伴侣PBP的基因克隆及亚细胞定位研究 |
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| 刘缨 朱美财 王荫静 占志 刘成刚 |
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| 关键词:DnaJ分子伴侣蛋白 基因 转染细胞 外周蛋白结合蛋白 |
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| 主要内容:目的:从人骨骼肌cDNA文库中,分离、鉴定视网膜感光受体外周蛋白的结合蛋白(PBP)—DnaJ(HSP40)类分子伴侣,并初步分析其在转染的哺乳动物细胞中的表达及分布:方法:以^32p-dCTP标记探针杂交筛选人骨骼肌cDNA文库,对阳性克隆进行序列分析,并以脂质体介导转染哺乳动物细胞,用免疫印迹及间接免疫荧光染色法检测目的蛋白的表达。结果:筛选出全长pbp基因,经与GenBank中的序列比较分析证实,与DnaJ家族的1个成员-mrj(1.5kb)的序列相同。且含140bp左右富含GC的非编码区上游序列。在COS-7细胞中瞬时表达的PBP,大多呈典型的胞浆分布,而J-domain缺失的pbp片段多为胞核分布。而在CHO细胞中稳定表达的PBP,在处于不同细胞周期时相的细胞中的分布不同:结论:DnaJ除与HSP70(DnaK)协同发挥重要功能外,其本身作为分子伴侣也可能发挥着重要作用,且与细胞周期可能存在某种密切联系。 |
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| 《细胞与分子免疫学杂志》 2003,19(6).-531-534 |
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