| 人骨保护素在毕赤酵母中的分泌表达及表达产物的生物活性分析 |
| 刘继中[1] 陈苏民[2] 李毅[2] 胡蕴玉[1] 纪宗玲[2] 杨彤涛[3] |
| 关键词：人骨保护素 毕赤酵母 分泌表达 表达产物 生物活性 |
| 主要内容：为了在毕赤酵母表达系统中分泌表达人骨保护素(osteoprotegerin，OPG)，以人骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板，采用RT—PCR法得到人OPG编码区cDNA，克隆入毕赤酵母表达载体pPICZ—B，电转化毕赤酵母GS115(Mut^+)，经3％甲醇诱导分泌表达人OPG与组氨酸的融合蛋白，SDS—PAGE及Westem印迹分析表明，有分子量约66kD的目的蛋白表达、纯化后的表达产物加入体外培养的小鼠骨髓细胞培养基中，当浓度为100ng／ml时，象牙片上骨吸收陷窝的数量及玻片上的TRAP阳性多核细胞的数量均减少(P<0．05)，而同时加入人OPG的多克隆抗体后，这一抑制作用可被拮抗，在浓度为50ng/ml时则无此作用,人OPG蛋白在酵母系统的成功表达，为该蛋白的进一步应用研究提供了依据。 |
| 《中国生物化学与分子生物学报》 2003,19(5).-566-571 |
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