| Dook4和Dok5PTB结构域融合蛋白的表达和纯化 |
| 阎志勇[1] 吴爱群[1] 张勇[2] 由振东[2] 路长林[2] 周明明[3] 何成[2] |
| 关键词：Dook4 Dok5 PTB结构域 融合蛋白 酪氨酸激酶受体 大肠杆菌 纯化 |
| 主要内容：目的：制备Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白。方法：用PCR方法分别扩增编码Dok4、Dok5PTB结构域的cDNA，并将其克隆人表达载体pGEX-4T—3中，转化大肠杆菌BL-21，构建成表达GST—PTB融合蛋白的菌株。经IPTG诱导表达后，经Glutathion-Sepharose4B亲和层析柱纯化，用SDS-PAGE进行分析，该融合蛋白的表达量超过菌体总蛋白的25％。结果：获得重组的GST-4PTB和GST—5PTB融合蛋白，纯度在95％以上，产物得率约75％。结论：成功制备高纯度Dok4和Dok5PTB结构域的GST融合蛋白，为进一步研究磷酸化酪氨酸结合结构域(PTB)的结构和生物学功能奠定基础。 |
| 《河南医学研究》 2003,12(2).-100-103 |
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