| YFP－CD18融合蛋白在U937细胞株中的表达与鉴定 |
| 严鸣[1] 毛积芳[2] 钟纪根[1] 何健[3] 朱秋峰[4] 徐仁宝[1] |
| 关键词：YFP CD18 融合蛋白 U937细胞株 表达 黄色荧光蛋白 |
| 主要内容：目的：构建并表达Mac-1的β链CD18与黄色荧光蛋白（YFP）的融合蛋白YFP-CD18，为进一步直视研究Mac-1在白细胞内的分布、走向及归宿提供物质条件。方法：首先将CD18的全长cDNA与pEYFP-C1进行酶切，构建YFP与CD18的N末端连接的表达载体，并将其转染至U937细胞株中进行表达。通过荧光显微镜观察转染成功后的U937细胞黄色荧光是否存在，以及流式细胞术检测确定PMA刺激后YFP-CD18活化后可否由胞浆内转位至膜上和测定PMA活化前后转染的U937细胞与其配基ICAM-1粘附活性的变化等方面进行鉴定。结果：经酶切鉴定，pYFP-CD18构建正确，转染U937细胞株后，可见YFP-CD18融合蛋白发出的黄色荧光。结论：构建完成YFP-CD18融合基因并可以在U937细胞株中进行表达。 |
| 《生物技术》 2003,13(4).-4-6 |
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