趋化性细胞因子MTCKl/mPBP的原核表达、纯化及活性分析
 
李燕 付文先 朱梦嫘 陈慰峰

关键词:趋化性细胞因子 MTCKl/mPBP 原核表达 蛋白纯化 趋化活性
 
主要内容:目的 原核表达、纯化小鼠CXC亚家族趋化性细胞因子MTCK1/mPBP并测定其生物学活性。方法 构建原核表达载体pQE-30-MTCK1/mPBP;在大肠杆菌M15菌株中表达重组蛋白6xHisMTCK1/mPBP,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白进行纯化。采用Boyden小室对纯化的MTCK1/mPBP蛋白进行趋化活性分析。结果 通过优化表达和纯化条件,获得了重组.MTCK1/mPBP蛋白,并对大肠杆菌包涵体蛋白进行变性和复性处理。趋化试验表明,原核表达的MTCK1/mPBP蛋白对转染有CXCR2受体的293细胞系具有明显的趋化能力,并呈现浓度依赖性。结论 利用原核表达系统,表达并纯化了重组趋化性细胞因子6xHis-MTCK1/mPBP蛋白,体外功能试验证实有生物学活性.
 
《中华微生物学和免疫学杂志》  2003,23(6).-459-463
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