| 快速构建蛋白质结构域克隆库的方法 |
| 马素参[1] 黄海明[2] 彭隽敏[3] 俞强[4] 任瑞宝[5] 高友鹤[1] |
| 关键词：蛋白质结构域 克隆库 结构域蛋白质组学 SH2结构域 细胞信号转导 |
| 主要内容：对蛋白质组学的研究有许多不同的切入方法，从研究的生物学意义和可行性考虑，提出从蛋白结构域入手进行蛋白质组学研究．SH2(Src homology2)结构域是细胞信号转导中重要的元件之一，人SH2结构域共有约120种，对其进行研究将深刻揭示细胞信号转导的规律．为了得到人所有的SH2结构域序列及克隆，首先在公共数据库里检索出了人所有的SH2结构域序列，利用国际上现有的共享资源IMAGE(Integrated Molecular Analysis of Genomes and Their Expression)克隆为PCR模板，解决了从cDNA文库中难以克隆低丰度结构域的问题．利用有方向性的TOPO克隆技术提高克隆效率，从而快速高效地构建了包括60个SH2结构域的克隆库．克隆库可以方便地转换到GATEWAY系统具有各种用途的栽体上，为SH2结构域的蛋白质组学研究奠定了坚实的基础． |
| 《中国生物化学与分子生物学报》 2003,19(4).-537-541 |
| 全文下载请进入http://hightech.stlib.cn/tpi_1/sysasp/include/index.asp |
微信公众号